Luminiscencijska mikroskopija: značajke proučavanja

Sadržaj:

Luminiscencijska mikroskopija: značajke proučavanja
Luminiscencijska mikroskopija: značajke proučavanja
Anonim

Izraz "mikroskopija" ima grčke korijene. U prijevodu to znači proučavanje objekata pomoću visoko preciznih instrumenata. Nedavno su fluorescentna i elektronska mikroskopija sve popularnije.

fluorescentna mikroskopija
fluorescentna mikroskopija

Rezolucija

Pod njim, u pravilu, razumiju minimalnu udaljenost na kojoj se mogu locirati jasno prepoznatljivi objekti. Stupanj prodora u mikroskopski svijet, sposobnost razmatranja veličine elementa koji se proučava ovisit će o razlučivosti opreme. Pri velikom povećanju, granice objekata mogu se spojiti. Sukladno tome, postoje određene granice izvan kojih je aproksimacija elemenata besmislena.

Metoda luminiscentne mikroskopije: mehanizam

Kada se energija koju apsorbira tvar pretvori u vidljivo zračenje, nastaje sjaj. Zove se luminiscencija. Taj je fenomen posljedica činjenice da neke tvari pod utjecajem svjetlosti počinju emitirati zrake različite (obično velike) valne duljine. Osim toga, neki objekti koji pod normalnom rasvjetom imaju određenuboje, pod utjecajem ultraljubičastog mijenjaju boju.

metoda fluorescentne mikroskopije
metoda fluorescentne mikroskopije

Posebnosti

Predmet koji se ne može vidjeti pod ultraljubičastim svjetlom može emitirati blistav sjaj ako se tretira posebnom tvari. U njemu elementi svijetle u različitim bojama u mraku. Jačina zračenja je različita, ali je u pravilu mala. U tom smislu, fluorescentna mikroskopija je učinkovita u zamračenoj prostoriji. Kada se koristi ova vrsta studija, objekt se promatra u svjetlu koje on sam emitira. Kemijski sastav tkiva, stanica će utjecati na kvalitetu studije. Fluorescentna mikroskopija se u određenoj mjeri smatra histokemijskom studijom.

Klasifikacija

Fluorescentna mikroskopija može biti primarna ili sekundarna. U potonjem slučaju, predmet se obrađuje posebnim spojevima koji daju sjaj. Primarna fluorescentna mikroskopija temelji se na vlastitoj sposobnosti elementa da emitira svjetlost.

fluorescentna i elektronska mikroskopija
fluorescentna i elektronska mikroskopija

Oprema

Fluorescentna mikroskopija se izvodi pomoću raznih uređaja. Njihov glavni element je iluminator. Opremljen je UV lampom. Osim toga, uređaji koriste skup filtara. U nekim uređajima postoji dosta različitih konfiguracija. Ovisno o tome koja boja se koristi za pobuđivanje luminiscencije - ultraljubičasta ili plava, između izvora svjetlosti i predmeta koji se proučava postavlja se odgovarajući filter. Budući da je sjaj mikroskopskog elementa energetski slabiji od uzbudljivog svjetla, bit će uhvaćen samo pod jednim uvjetom. Višak zraka iz izvora mora biti odrezan žuto-zelenim filterom. Nalazi se na okularu uređaja. Najizraženiji učinak luminescencije bit će kada filtar potpuno odsiječe zrake koje izlaze iz izvora svjetlosti.

Od čega se sastoji instalacija vidljivog svjetla? Sadrži izvor jakog svjetla i biološki mikroskop. Između zrcala uređaja i svjetiljke postavljen je plavo-ljubičasti filtar. Može biti FS-1, UFS-3 i tako dalje. Žuti filter se stavlja na okular mikroskopa. Uz njihovu pomoć, plavo-ljubičasto svjetlo pada na objekt. Pobuđuje luminescenciju. Ali ovo svjetlo može ometati viđenje sjaja. Stoga je na putu do oka odsječe žuti filter. Rasvjeta se postavlja prema Koehler metodi, s jednom iznimkom. Dijafragma kondenzatora mora biti potpuno otvorena. Prilikom pregleda važno je koristiti nefluorescentno ulje za uranjanje. Da bi se smanjio vlastiti sjaj, dodaje mu se nitrobenzen (2-10 kapi / 1 g).

primjena fluorescentne mikroskopije
primjena fluorescentne mikroskopije

Luminiscencijska mikroskopija: primjene u mikrobiologiji

Prednosti ove vrste studija su:

  1. Mogućnost slikanja u boji.
  2. Samoemitujući elementi visokog kontrasta na crnoj pozadini.
  3. Otkrivanje i lokalizacija određenih vrsta virusa i mikroba.
  4. Mogućnost proučavanja transparentnog i neprozirnogživi organizmi.
  5. Proučavanje životnih procesa u njihovoj dinamici.

Treba reći i da luminescentna mikroskopija doprinosi razvoju najfinijih metoda histo- i citokemije, ekspresnoj dijagnostici.

Preporučeni: