Svaka čestica, bila to molekula, atom ili ion, kao rezultat apsorpcije kvanta svjetlosti, prelazi u višu razinu energetskog stanja. Najčešće se događa prijelaz iz osnovnog stanja u pobuđeno stanje. To uzrokuje pojavu određenih apsorpcijskih vrpci u spektrima.
Apsorpcija zračenja dovodi do činjenice da kada ono prolazi kroz tvar, intenzitet tog zračenja opada s povećanjem broja čestica tvari određene optičke gustoće. Ovu metodu istraživanja predložio je V. M. Severgin još 1795. godine.
Ova metoda je najprikladnija za reakcije u kojima se analit može transformirati u obojeni spoj, što uzrokuje promjenu boje ispitne otopine. Mjerenjem njegove apsorpcije svjetlosti ili usporedbom boje s otopinom poznate koncentracije, lako je pronaći postotak tvari u otopini.
Osnovni zakon apsorpcije svjetlosti
Suština fotometrijskog određivanja su dva procesa:
- prijenos analita uupijajuća smjesa;
- mjerenje intenziteta apsorpcije tih istih vibracija otopinom ispitivane tvari.
Promjene u intenzitetu svjetlosti koja prolazi kroz materijal koji apsorbira svjetlost također će biti uzrokovana gubitkom svjetlosti zbog refleksije i raspršenja. Kako bi rezultat bio pouzdan, provode se paralelne studije za mjerenje parametara pri istoj debljini sloja, u identičnim kivetama, s istim otapalom. Dakle, smanjenje intenziteta svjetlosti ovisi uglavnom o koncentraciji otopine.
Smanjenje intenziteta svjetlosti koja prolazi kroz otopinu karakterizira koeficijent prijenosa svjetlosti (koji se naziva i njegov prijenos) T:
T=I / I0, gdje je:
- I - intenzitet svjetlosti koja prolazi kroz tvar;
- I0 - intenzitet upadnog svjetlosnog snopa.
Dakle, prijenos pokazuje udio neapsorbiranog svjetlosnog toka koji prolazi kroz ispitivanu otopinu. Algoritam inverzne vrijednosti prijenosa naziva se optička gustoća rješenja (D): D=(-lgT)=(-lg)(I / I0)=lg(I 0 / I).
Ova jednadžba pokazuje koji su parametri glavni za istraživanje. To uključuje valnu duljinu svjetlosti, debljinu kivete, koncentraciju otopine i optičku gustoću.
Bouguer-Lambert-Beer Law
To je matematički izraz koji prikazuje ovisnost smanjenja intenziteta monokromatskog svjetlosnog toka od koncentracijeupija i debljina sloja tekućine kroz koji prolazi:
I=I010-ε·S·ι, gdje je:
- ε - koeficijent apsorpcije svjetlosti;
- S - koncentracija tvari, mol/l;
- ι - debljina sloja analizirane otopine, vidi
Nakon transformacije, ova formula se može napisati: I / I0 =10-ε·S·ι.
Suština zakona je sljedeća: različite otopine istog spoja u jednakoj koncentraciji i debljini sloja u kiveti apsorbiraju isti dio svjetlosti koja pada na njih.
Uzimanjem logaritma posljednje jednadžbe, možete dobiti formulu: D=εCι.
Očito, optička gustoća izravno ovisi o koncentraciji otopine i debljini njezina sloja. Fizičko značenje molarnog koeficijenta apsorpcije postaje jasno. Jednako je D za jednomolarnu otopinu i s debljinom sloja od 1 cm.
Ograničenja u primjeni zakona
Ovaj odjeljak uključuje sljedeće stavke:
- Vrijedi samo za monokromatsko svjetlo.
- Koeficijent ε povezan je s indeksom loma medija, a posebno se mogu uočiti jaka odstupanja od zakona pri analizi visoko koncentriranih otopina.
- Temperatura pri mjerenju optičke gustoće mora biti konstantna (unutar nekoliko stupnjeva).
- Svjetlosni snop mora biti paralelan.
- PH medija mora biti konstantan.
- Zakon se primjenjuje na tvaričiji su centri za apsorpciju svjetlosti čestice istog tipa.
Metode za određivanje koncentracije
Vrijedi razmotriti metodu kalibracijske krivulje. Za njegovu izgradnju pripremite seriju otopina (5-10) s različitim koncentracijama ispitivane tvari i izmjerite njihovu optičku gustoću. Prema dobivenim vrijednostima crta se dijagram D u odnosu na koncentraciju. Graf je ravna linija od ishodišta. Omogućuje vam jednostavno određivanje koncentracije tvari iz rezultata mjerenja.
Postoji i metoda dodavanja. Koristi se rjeđe od prethodnog, ali vam omogućuje analizu rješenja složenog sastava, budući da uzima u obzir utjecaj dodatnih komponenti. Njegova je suština odrediti optičku gustoću medija Dx, koji sadrži analit nepoznate koncentracije Sx, uz ponovnu analizu iste otopine, ali s dodavanje određene količine testne komponente (Sst). Vrijednost Cx nalazi se pomoću izračuna ili grafikona.
Uvjeti istraživanja
Da bi fotometrijska istraživanja dala pouzdan rezultat, mora biti ispunjeno nekoliko uvjeta:
- reakcija mora završiti brzo i potpuno, selektivno i ponovljivo;
- boja dobivene tvari mora biti stabilna tijekom vremena i ne mijenjati se pod djelovanjem svjetlosti;
- testirana tvar se uzima u količini dovoljnoj da se pretvori u analitički oblik;
- mjerenjaoptička gustoća provodi se u rasponu valnih duljina u kojem je razlika u apsorpciji početnih reagensa i analizirane otopine najveća;
- apsorpcija svjetlosti referentne otopine smatra se optičkom nulom.