Suvremena medicina raspolaže specifičnim dijagnostičkim metodama koje omogućuju utvrđivanje etiologije bolesti kod ljudi na temelju definicije uzročnika, genetski stranih tvari koje potiču imunološki odgovor, nukleinskih kiselina, kao i alergijskih i imunoloških promjena koji nastaju zbog njegovih postupaka. Danas se RIA naširoko koristi u imunologiji i virologiji, odnosno radioimunotesti, ciljevi postavljanja, komponente, tijek, čije ćemo računovodstvo razmotriti u ovom članku. Ovaj test može otkriti antigene kao rezultat njihove interakcije s antitijelima.
Definicija
RIA je metoda za dijagnosticiranje biološki aktivnih tvari u tekućinama, koja se temelji na reakciji antigena s antitijelima pri korištenju radionuklidima obilježenih analognih tvari koje imaju posebne sustave vezanja. Nakon njihove interakcijenastaje imunološki kompleks koji se odvaja i proučava njegova radioaktivnost. Poznato je da se radioimuno ispitivanje provodi korištenjem standardnih kompleta reagensa.
Svaki reagens može odrediti koncentraciju jedne specifične tvari. Biološka tekućina uzeta od osobe pomiješa se s reagensom, nakon razdoblja inkubacije odvoje se slobodne i vezane radioaktivne tvari, zatim se radi radiometrija i izračunavaju rezultati. Za označavanje tvari koristi se izotop joda. Označava se i dodaje u određenom iznosu.
Prijava
Radioimuna analiza ima široku primjenu u medicini i mikrobiologiji. Koristi se za dijagnosticiranje bolesti srca i krvnih žila, bolesti endokrinog i drugih tjelesnih sustava. RIA se također često koriste za prepoznavanje uzroka neplodnosti, patologije razvoja fetusa. U onkologiji se ova analiza provodi kako bi se odredili markeri novotvorina kako bi se mogla pratiti učinkovitost liječenja. U imunologiji, RIA se koristi za proučavanje prisutnosti imunoglobulina, enzima, proteina i tako dalje u krvi. Danas vam ova analiza omogućuje otkrivanje koncentracije različitih hormona do milijuntog dijela jednog grama. Stoga se radioimuna analiza krvi široko koristi u kardiologiji, onkologiji, endokrinologiji, ginekologiji i virologiji.
RIA metode
Uobičajeno je razlikovati nekoliko metoda analize, ovisno o prirodireakcije:
- Nekompetitivnu metodu karakteriziraju takve reakcijske komponente kao što su standardni antigeni i antigeni koji se mogu detektirati, otopina pufera, antitijela obilježena izotopima, određena antitijela koja se vežu na sorbent. Antitijelima koja se testiraju dodaje se antigen. Nakon inkubacije pojavljuju se kompleksi antigen-antitijelo, sorbent se ispere, dodaju se obilježena antitijela koja se vežu na antigen u kompleksu. Radioaktivnost ovisi o koncentraciji antigena koji se ispituje.
- Kompetitivni radioimuni test potaknut je konkurencijom antigena. Ovdje se nalaze komponente reakcije kao što su kontrolni i određeni antigeni, puferska otopina, određena antitijela koja se vežu na sorbent, kao i antigen obilježen izotopom. Dijagnoza počinje uvođenjem antigena koji se ispituje. Na sorbentu nastaje kompleks antigen-antitijelo. Zatim se sorbent ispere i ubrizgava obilježeni antigen. Pritom se veže za antitijelo. Uz pomoć brojača mjeri se reakcija i količina radioaktivnosti. To će biti obrnuto proporcionalno količini antigena u uzorku.
- Neizravna metoda je najčešća. U ovom slučaju, radioimunotest reakcijske komponente ima kao što su kontrolni i ispitni serum, antigene ili antitijela koja su vezana na sorbent, antitijela obilježena izotopima, puferske otopine. Protutijela ili antigeni koji su dijagnosticirani reagiraju s antigenima ili antitijelima koja su vezana na sorbent. Zatim se inkubat uklanja, ubrizgavaju se obilježena antitijela koja se vežu nakompleksi antigen-antitijelo.
Metodologija analize
Dakle, radioimunotest se provodi pomoću posebnih reagensa. Skupovi su standardni, tako da bilo kakve pogreške ili prekršaji nisu dopušteni. Dijagnostički rezultati su pouzdani. Analiza se provodi ujutro, za to uzimaju vensku krv od osobe. U laboratoriju se serum odvaja od krvi koja će se koristiti za RIA. Ovaj serum se miješa s reagensima. Dobivena smjesa se inkubira na zadanoj temperaturi u termostatu.
Slobodni i vezani izotopi se odvajaju u dobivenoj smjesi. Nakon toga, primljeni materijal se ispituje, a rezultati se izračunavaju. Mehanizam radioimunotestiranja ima nekoliko opcija. Gore opisana tehnika je RIA tekuće faze, budući da su sve komponente u tekućem stanju. Postoji RIA i čvrsta faza, gdje se antitijela stavljaju u nosač koji se ne otapa u tekućini.
Dostupnost dijagnostike
Primjena ove dijagnostičke metode u medicini svake je godine sve popularnija. Radioimunotest je odnedavno standardna dijagnostička metoda koju može propisati liječnik prilikom postavljanja konačne dijagnoze. Dugo vremena ova vrsta analize provodila se samo u laboratorijima, danas je postala uobičajena metoda istraživanja. Ali RIA zahtijeva korištenje skupe opreme (gama brojači), a kompleti reagensa imaju kratak vijek trajanja. Sve je to glavni nedostatak takve analize, koji određuje njezinuskupa cijena.
Osim toga, RIA je nedavno počela zamjenjivati modernije istraživačke metode koje ne zahtijevaju interakciju s izotopima. To uključuje enzimski imunotest. Stoga je RIA poželjna u mnogim klinikama. Dugo se koristi u velikim gradovima i dijagnostičkim centrima, ali u običnim bolnicama u malim gradovima ova se analiza praktički ne koristi zbog visoke cijene.
Dignity of RIA
Radioimunotest ima mnoge prednosti. Prilično je specifičan i ima visoku osjetljivost, što omogućuje određivanje prisutnosti biološki aktivnih tvari u nevjerojatno malim količinama. Ova se analiza provodi vrlo jednostavno, od osobe je potrebno samo donirati vensku krv. Rezultati testa su 100% točni i spremni već sljedeći dan. RIA se također može lako automatizirati. Dakle, ova analiza vam omogućuje da identificirate proteine koji su otpadni produkti zaraznih bakterija, što ukazuje na prisutnost infekcije u tijelu.
Dijagnoza u virusologiji
RIA koja najviše obećava je za virologiju, jer vam omogućuje brzo prepoznavanje virusnih patogena. To je zbog činjenice da posljednjih godina raste incidencija raznih infekcija, koje se šire velikom brzinom, uzrokujući smrtnost među ljudima. To se posebno odnosi na zemlje koje nemaju visoku razinudruštvenog i ekonomskog razvoja (zemlje Dalekog istoka), radioimunotest je ovdje jednostavno neophodan. Mikrobiologija također koristi ovu dijagnostičku metodu za otkrivanje zaraznih bolesti uzrokovanih patogenim bakterijama. Na primjer, RIA se široko koristi za otkrivanje trbušnog tifusa. U prvim danima bolesti, prije imenovanja liječenja, potrebno je provesti studiju izmeta i povraćanja. Međutim, dijagnostički rezultati će se dobiti nakon dugo vremena. Ovdje RIA dolazi u pomoć, analiza vam omogućuje da u kratkom vremenu identificirate uzročnika bolesti. Osoba daruje krv, sljedeći dan rezultati studije su spremni. Ova analiza pomaže u postavljanju točne dijagnoze.
Rezultati
Radioimunotest je trenutno jedna od najosjetljivijih dijagnostičkih metoda. Koristi se za analizu bilo koje tvari protiv koje se mogu dobiti antitijela. Ova metoda omogućuje izradu velikog broja uzoraka u najmanjem volumenu ispitivane tekućine, kao i bilježenje rezultata u najkraćem mogućem vremenu, budući da se može u potpunosti automatizirati. Ovu analizu razvio je 1950-ih Solomon Burson. Trideset godina kasnije postao je raširen. Do danas ne postoji stopostotna alternativa RIA-i, budući da analiza ima visoku osjetljivost. RIA se koristi u raznim granama medicine, kao iu mikrobiologiji i virologiji.
Konačno
Primjena metode u virologiji danas je vrlo relevantna, jer dajesposobnost istraživanja širenja infekcija, postavljanje točne dijagnoze i propisivanje specifičnog liječenja. Ovaj problem je posebno aktualan za zemlje koje imaju nisku razinu ekonomskog i društvenog razvoja. Također, ova analiza omogućuje otkrivanje količine hormona i enzima u ljudskom tijelu. Da bi se dobili pouzdani rezultati, istraživač treba samo dati krv za analizu. Medicina ne miruje, zajedno s radioimunotestom pojavljuju se nove metode istraživanja, ali RIA je i dalje jedan od vodećih u medicinskoj dijagnostici.
