Selenite bujon je medij za obogaćivanje sa selektivnim svojstvima, dizajniran za izolaciju patogenih bakterija iz roda Salmonella (lat. Salmonella). Vrlo je učinkovit ako je potrebno otkriti ovaj patogen među ostalim predstavnicima crijevne mikroflore. Medij se koristi i za kliničku dijagnostiku i za sanitarne svrhe u ispitivanju hrane.
Opće karakteristike
Selenite juha priprema se na bazi praha, koji je homogenizirana mješavina različitih komponenti sastava. Boja suhog materijala može biti svijetložuta ili krem, ovisno o vrsti medija. Puder ima svojstva slobodnog protoka.
Gotova selenit juha je tekući prozirni medij svijetložute boje. Ova masa se sipa u posude gdje se vrši sjetva za daljnju inkubaciju.
Postoje tri glavne vrste selenitnog bujona:
- čisti medij - pogodan za izolaciju salmonele iz kliničkog i sanitarnog materijala;
- s dodatkom manitola (dvokomponentni bujon) - dizajniran za rad samo s kliničkim materijalom;
- cistein-selenitni medij - može se koristiti za izolaciju salmonele iz biomaterijala patološkog pacijenta (izmet, urin, itd.).
Ove se vrste malo razlikuju po sastavu i radnji.
Glavni zadatak selenitnog bujona je poticanje nakupljanja salmonele, inhibiranje rasta prateće mikroflore. To omogućuje ne samo otkrivanje patogena u materijalu, već i njegovo naknadno prenošenje u agar. Medij je razvio Leifler, koji je prvi otkrio selektivni učinak selenita protiv salmonele.
Sastav
Selenite bujon sadrži:
- kazein hidrolizat;
- laktoza;
- natrijev fosfat;
- natrijev hidroselenit.
Selenit-cistein medij, osim ovih komponenti, sadrži L-cistein i natrijev hidrogen fosfat. Sastav juhe od manitola razlikuje se po tome što umjesto hidrolizata kazeina uključuje peptičku probavu životinjskog tkiva. U takvom okruženju nema laktoze, ali ima manitola. Potonji djeluje kao fermentirajući supstrat i osigurava puferska svojstva juhe.
Sve komponente praha, osim natrijevog hidroselenita, uvjetno se nazivaju dijelom A, a selektivna tvar dio B.
Princip rada i svojstva okoline
Selenite bujon radi kao medij za pohranusa selektivnim djelovanjem. Selektivni učinak postiže se zbog toksičnosti selenita, koji inhibira rast većine mikroorganizama. Istodobno, bakterije iz roda Salmonella mogu obnoviti ovaj spoj, čime se eliminira toksični učinak na vlastite stanice. Međutim, kao rezultat reakcije nastaje lužina koja smanjuje štetan učinak selenita na rast pridružene mikroflore, te je stoga potrebno stabilizirati pH. Ovu funkciju obavljaju bakterije koje fermentiraju laktozu s stvaranjem kiseline. Puferiranje medija osigurava fosfat.
U dvokomponentnom bujonu pH se stabilizira manitolom. Cisteinski medij poboljšava selektivni učinak protiv salmonele. Takva je juha učinkovita za suzbijanje zarazne pozadine u bolesnika s neakutnim stadijem bolesti ili rekonvalescenta.
Manifestacija karakteristika rasta referentnih sojeva u mediju može se uočiti nakon 12-24 sata od početka inkubacije. U ovom slučaju, salmonela stvara bezbojne kolonije.
Značajke kuhanja
Priprema medija se provodi u dvije faze. Najprije se napravi otopina sa selektivnom komponentom u količini od 4 grama natrijevog selenita po litri destilirane vode. Zatim dodajte 19 grama glavnog praha (dio A). Otopina se temeljito promiješa i zagrijava dok se čestice potpuno ne otope, nakon čega se izlije u sterilne epruvete.
Prilikom kuhanja važno je pratititemperaturni režim, budući da je medij nestabilan na pregrijavanje. Sterilizacija juhe može se provesti samo u vodenoj kupelji ili koristiti mlaz pare. Autoklaviranje medija je strogo zabranjeno.
