Ovaj članak će biti posvećen fenomenu reakcije oborine. Ovdje ćemo razmotriti značajke formulacije ovog fenomena, fenomen difuzije, opće karakteristike, ulogu u ljudskom životu i još mnogo toga.
Uvod u fenomen
Precipitacija je fenomen serološkog tipa, tijekom kojeg topljivi antigeni stupaju u interakciju s antitijelima i kao rezultat toga se opaža precipitacija - precipitat.
Opća karakteristika precipitacijske reakcije je oblik koordiniran utjecaj antigena i antitijela. Ove vrste interakcija omogućuju utvrđivanje prisutnosti nepoznatih antigena u ispitivanoj tvari dodavanjem poznatih protutijela i antigena. Proces taloženja bez prisutnosti soli će se odvijati lošije, a najbolji optimum je u rasponu od 7,0-7,4 pH.
Sastavnici reakcije
Postoje tri glavna elementa među komponentama reakcije oborine:
- Antigen molekularne prirode. U stanju je finog tipa, drugim riječima, totopljiv. Također, takav antigen se naziva precipitogen, što je lizat ili ekstrakt tkiva itd. Precipitogen ima karakterističnu razliku od aglutinogena, koja leži u veličini čestica od kojih se sastoji. Aglutinogen ima inherentnu veličinu stanice, a precipitogeni su proporcionalni veličini molekule. Otopinu antigena karakterizira prozirnost.
- Protutijelo pronađeno u ljudskom krvnom serumu, kao iu imunološkom dijagnostičkom serumu, koji sadrži proučavana antitijela.
- Elektroliti su otopine natrijevog klorida koje su izotonične.
Proizvodnja precipitogena
Postavljanje precipitacijske reakcije nemoguće je bez precipitogena koji se dobiva mljevenjem materijala i izdvajanjem proteinskih antigena iz njih. Ekstrakcija se vrši kuhanjem ili drugim metodama.
Lizati, kao i ekstrakti tkiva i organa, krvni serum, razne vrste filtrata na bazi mikrobnih bujonskih kultura, kao i solni ekstrakt mikroorganizama i autolizatnih tvari, upečatljivi su primjer precipitogena.
Postavljanje u oborina
Sada razmotrimo način postavljanja reakcije taloženja.
Provodi se prstenasta reakcija taloženja koja se odvija u posebno pripremljenim epruvetama. Serum se unosi u šupljinu posuđa, izlijevajući ga preko zida uz pomoć izljeva za pipetu. Zatim se odgovarajuća količina taloga pažljivo nanese na vrh, a zatim se cijev iz horizontalnog dovede u okomiti položaj. Postavljanje i uzimanje u obzir reakcije taloženja vrlo je pedantna operacija. Rezultat se bilježi nakon pojave bijelog prstena na granici između antigena i antitijela. Ako reagirajući elementi reakcije odgovaraju jedni drugima, onda se vežu, ali to postaje vidljivo nakon dužeg vremenskog razdoblja njihove interakcije
Reakcija taloženja također se provodi u Petrijevoj zdjelici ili na staklu stakalca, gdje se prenosi agar gel, nanoseći ga u malom sloju. Nakon što se stvrdne u gelu, izrezuje se mali broj jažica u koje će se stavljati antigeni i antitijela. Postoje dva načina za izvođenje ove radnje: metoda radijalne imunodifuzije i dvostruke imunodifuzije.
Opće informacije
Mehanika rada oborine slična je uređaju za aglutinaciju. Pod utjecajem seruma imunološkog tipa, antigen, koji je već ušao u reakciju, smanjuje svoj stupanj disperznosti. Važan uvjet je transparentnost i seruma i antigena.
Možete poboljšati registraciju reakcije ako antigene postavite na antitijela. Kao rezultat toga, može se uočiti pojava taloga u obliku prstena. Ovaj fenomen naziva se prstenasta precipitacija i provodi se u posebnim cijevima promjera od 2,5 do 3,5 mm. Jedan od najčešćih primjera precipitacijske reakcije je dijagnoza antraksa.
Precipitacija omogućuje određivanje razine toksigenosti kulture difterije u agaru.
Tijekom reakcije koja se razmatradolazi do precipitacije antigenskih kompleksa i antitijela. Precipitacija je imunološki fenomen koji omogućuje određivanje količine antitijela u krvnom serumu bolesne ili cijepljene osobe i životinja.
Posljedica titracije
Važno je znati da se podaci dobiveni titracijom gornje metode ne mogu kvantificirati. Za izradu i analizu kvantitativne procjene sadržanog broja antitijela, M. Heidelberger i E. Kabat razvili su posebnu reakcijsku tehniku koja se temelji na pretraživanju i identifikaciji zone ekvivalencije. Miješanje dobnog broja antigena s konstantnim volumenom antiseruma dovodi do povećanja prvotno formiranog precipitata, a zatim se opet smanjuje zbog povećanja sposobnosti otapanja kompleksa antigena. Određivanjem količine antitijela u supernatantima sadržanim u svakoj epruveti, možete ustanoviti da će određenom broju posuda s antitijelima nedostajati tekućina. Ovdje će u usporedbi s drugim epruvetama nastati najveći talog. Zbog toga i oduzimanja taloga antigenskog proteina od ukupne vrijednosti proteina, moguće je dobiti točnu vrijednost antitijela sadržanih u volumenu specifičnog seruma koji se proučava. Nadalje, količina proteinskih molekula precipitata određena je količinom dušika ili kolorimetrijskim metodama.
Procjena vrijednosti
Procjena vrijednosti precipitacije u dijagnostičkoj metodologiji treba uzeti u obzir mogućnost prisutnosti u imunološkom serumu antitijela koje nema svojstvo precipitina, iz čega proizlazi da sam precipitat ne mora biti nastala nakon reakcije s antigenima. Popis takvih molekula uključuje nepotpuna antitijela i neke vrste iz skupine gama-A globulina.
Reakcija taloženja u laboratorijskim uvjetima nalazi svoju primjenu u raznim vrstama modifikacija. Na primjer, reakcija termoprecipitacije koristi se za otkrivanje bakterijskih antigena botulizma, antraksa itd., koji ne prolaze termičku denaturaciju. Za razliku od prstenaste precipitacije, ova vrsta reakcije koristi filtrate dotičnog materijala u prokuhanom stanju.
Analiza reakcije taloženja u složenoj smjesi ne dopušta karakteriziranje svojstava pojedinih elemenata smjese. U takvim slučajevima osoba pribjegava metodi precipitacije u agaru, a također koristi imunoelektroferezu.
Difuzne oborine
U ovom području istraživanja postoji koncept reakcije difuzne precipitacije (RPD). Temelji se na sposobnosti difuzije u gelu antitijela i topljivih antigena. Difuzija je sposobnost molekule određene tvari da prodre u molekule druge, što je uzrokovano toplinskim kretanjem.
Gel je sustav dispergiranog tipa u kojem je tekuća faza ravnomjerno raspoređena u čvrstoj fazi. Za takvu reakciju najčešće se koristi agar gel.
Nakon davanja parametara, uuvjetima pod kojima se molekule mogu difundirati jedna u odnosu na drugu, njihov susret će biti popraćen stvaranjem kompleksa antigen + protutijelo. Takva se neoplazma može difundirati, nalazeći se u samom gelu, i taložit će se u obliku trake koja se može otkriti golim okom. Ako su antigen i antitijelo homologni, neće se formirati traka.
Stvaranje uvjeta pod kojima će se odvijati difuzija u sloju agara uključuje izlijevanje komponenti, ali ukupan broj jažica i njihov relativni položaj određuju se vrstu zadatka koji je potreban odlučiti. RPD daje osobi mogućnost da otkrije i identificira nepoznate izolirane viruse testiranjem korištenjem poznatih seruma antitijela.
Prijava
Oborina se široko koristi ne samo u dijagnostici bolesti, već svoju primjenu nalazi iu forenzično-medicinskim pregledima. Teško je zamisliti analizu u kojoj je moguće odrediti vrstu krvi, dio organa ili tkiva pronađenog na zločinačkom oružju koje ne koristi reakciju oborine. Tijekom tog procesa koriste se taložni serumi koji se dobivaju imunizacijom raznih životinja i ptica. Važno je da razina titra u serumu nije niža od 1:10000, a također mora imati dovoljnu specifičnost. Od otkrivenog mjesta krvi ili njezine kore izrađuje se ekstrakt za fizikalnu. rješenje, kojem će se dalje izlagatiprecipitirajući serum. Prema ovoj reakciji moguće je ustanoviti vrste proteina tkiva i organa kako ljudi tako i životinja. Dobivanje mutnih ekstrakata prisiljava nas da se pribjegne taloženju na agaru.
Zaključci
Analizirajući pročitane informacije, možemo zaključiti da su reakcije precipitacije iznimno važne za osobu, jer omogućuju dijagnosticiranje različitih antigena korištenjem antitijela, ovaj fenomen se također naširoko koristi u forenzično-medicinskim pregledima i omogućuje vam da identificirate vrstu krv, tkivo ili organ u odnosu na određeni subjekt. Postoji nekoliko vrsta i metoda oborina, koje se koriste u skladu s nastalim potrebama problema koji se rješava.
